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Descifrado de análisis

Análisis de PCR: ventajas, interpretación y descripción del método.

El análisis de PCR se discutió por primera vez en 1983. Esta técnica fue desarrollada por Cary Mullis y su personal de laboratorio. Desde entonces, la popularidad del estudio ha aumentado constantemente desde Tiene un número significativo de ventajas sobre otros métodos.

Hoy, el diagnóstico por PCR es un estándar o estándar en la detección de infecciones y patógenos, especialmente asintomáticos. Esto es principalmente un diagnóstico preclínico.

Contenido

Análisis de PCR, ¿qué es?

Análisis de PCR, ¿qué es?

Análisis en una máquina de PCR

La esencia del análisis de PCR radica en el hecho de que las secuencias de ácido nucleico (ADN o ARN) características de un determinado tipo de patógeno se clonan (multiplican).

La abreviatura PCR significa - reacción en cadena de la polimerasa.

La principal característica distintiva de este método es la amplificación, es decir creando una gran cantidad de copias del gen requerido o su fragmento. Todo esto se hace fuera del cuerpo, es decir in vitro

Entonces, si se realizan 20 ciclos de PCR, se obtienen aproximadamente 1 millón de copias o más. Esto le permite detectar infecciones incluso con una pequeña cantidad en el material de origen, cuando otros métodos de análisis no tienen poder. Esto determina la alta sensibilidad de este método.

En palabras simples, puede hacer una analogía: no notará un pequeño grano de arena en el piso, pero después de aumentar el número de granos de arena un millón de veces (por PCR), un montón de arena ya será claramente visible.

Beneficios de los diagnósticos de PCR

Beneficios de los diagnósticos de PCR

Las principales ventajas del ensayo de PCR para la infección son:

  • и специфичность в сравнении с другими методами, используемыми для выявления инфекционных агентов; la mayor sensibilidad y especificidad en comparación con otros métodos utilizados para detectar agentes infecciosos;
  • la capacidad de detectar microorganismos en una variedad de materiales biológicos (sangre, orina, secreciones vaginales, saliva, etc.);
  • la capacidad de identificar simultáneamente varios microorganismos causales, si los hay. A modo de comparación, el uso de métodos bacteriológicos no brinda esa oportunidad, porque es necesario usar diferentes medios para cultivar varios microbios patógenos;
  • la posibilidad de transportar material biológico, porque para identificar el patógeno, no es necesario mantenerlo vivo;
  • velocidad de análisis;
  • la precisión del diagnóstico etiológico;
  • la capacidad de cuantificar patógenos es especialmente importante para los microbios oportunistas que pueden causar enfermedades solo después de alcanzar una cierta concentración;
  • La capacidad de controlar el curso del proceso infeccioso durante el tratamiento.

Análisis de PCR para infección

Actualmente, la mayoría de las enfermedades infecciosas genitales (y otras) están determinadas por la reacción en cadena de la polimerasa. El diagnóstico está muy extendido debido a su alta sensibilidad y especificidad.

Especialmente popular es el análisis de PCR para clamidia.

Análisis de PCR para clamidia Esto se debe al hecho de que estos microorganismos viven intracelularmente, lo que crea ciertas dificultades en su detección.

El diagnóstico por PCR puede detectar incluso el menor número de clamidia, que, por regla general, todavía no conduce a la aparición de síntomas clínicos. Incluso la presencia de solo 2 moléculas de ácido nucleico en el material de prueba revela una infección causante.

Y esta es la clave para un tratamiento exitoso, que comienza incluso en la etapa preclínica.

Las infecciones también se determinan:

  • VIH
  • hepatitis viral;
  • tuberculosis
  • encefalitis transmitida por garrapatas;
  • diversas enfermedades de transmisión sexual, etc.

El diagnóstico por PCR puede resolver una serie de otras tareas importantes:

  • seguimiento de la terapia y evaluación de su efectividad;
  • la definición de "carga de virus", sobre la base de la cual se realiza una selección individual de la dosis del medicamento;
  • identificación de cepas de microorganismos que se distinguen por resistencia farmacológica (insensibilidad a las drogas).

Preparándose para el examen

No es necesario prepararse a propósito para el análisis, que se llevará a cabo por PCR. Sin embargo, es muy importante que el especialista seleccione el material de acuerdo con todas las condiciones de esterilidad necesarias.

Entonces, por ejemplo, se deben usar sistemas de vacío especiales para tomar sangre, se deben usar tubos de ensayo especiales para tomar el secreto de los genitales, etc.

En algunos casos, el material debe transportarse al laboratorio. Para hacer esto correctamente, es necesario cerrar herméticamente el recipiente con material biológico. Esto evitará la penetración de otros microorganismos que viven en el entorno externo.

Decodificación del resultado de la PCR

Los resultados del análisis de PCR pueden ser de dos opciones:

  • positivo: se detecta el patógeno;
  • negativo: no se detectó ningún patógeno.

Debe saber que, incluso en ausencia de síntomas clínicos, se puede obtener un resultado positivo.

Decodificación del resultado de la PCR En este caso, es necesario centrarse en los datos de la reacción de polimerasa, ya que le permite identificar la enfermedad en la etapa preclínica.

A veces se puede obtener una respuesta dudosa cuando el número de copias detectadas corresponde al límite superior de la norma. Para aclarar la causa de la enfermedad, el análisis debe repetirse, prestando especial atención a las condiciones para la recolección de material biológico.

¿Qué tan exactos son los diagnósticos de PCR?

Las principales ventajas de los diagnósticos de PCR se pueden formular en forma de varias tesis:

  • la posibilidad de obtener una gran cantidad de copias de microorganismos patógenos;
  • Un gran número de copias es la clave para una secuenciación exitosa (identificación).

Esto proporciona un análisis de PCR de alta precisión para la detección de patógenos intracelulares y microorganismos de crecimiento lento.

Por lo tanto, el método es especialmente informativo para la detección de micobacterias tuberculosas y otros agentes infecciosos similares. Tiene la mayor precisión y no necesita verificar dos veces los resultados obtenidos (excepto en casos casuísticos).

Para obtener los resultados más confiables, es necesario cumplir con dos condiciones básicas que evitan la infección exógena (externa):

  • ingesta adecuada de material;
  • transporte adecuado
Interesante

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